Cara tekad glukosa oksidase glukosa
Prinsip cara kasebut. Cara kasebut adhedhasar spesifik tumindak enzim glukosa oksidase. Enzim iki nyoksidasi glukosa ing ngarsane oksigen molekular kanggo mbentuk glukonolakton, sing spololisis dadi asam glukonol. Glukosa glukosa ngoksidasi glukosa kanggo mbentuk hidrogen peroksida (H2Oh2), sing ditanggepi karo 4-aminoantipyrine lan fenol ing tumindak peroksida. Akibaté, senyawa warna pink dibentuk, sing kapadhetan optik ing 510 nm berkat konsentrasi glukosa ing sampel kasebut.
glukosa + O2 + H2Oh → Asam glukonik + H2Oh2
2 N2Oh2 + Fenol + 4-aminoantipyrine + → quinonymine + 4H2Oh
Peralatan CPK, centrifuge, termostat, rak, tabung tes, pipette, bahan biologis, reagen sing ana ing solusi sing digunakake.
conto eksperimen, ml
sampel standar, ml
tes idle (N2O), ml
Solusi kalibrasi glukosa (referensi)
Tabung diobong ing termostat ing suhu 37 ° C suwene 15 menit, banjur diwarnai kanthi warna ing CPC kanthi filter ijo ing cuvettes kanthi ketebalan lapisan 5 mm tinimbang sampel kosong (N2O). Werna pink ora stabil sajrone 1 jam sawise inkubasi.
Pitungan Isi glukosa diprodhuksi dening rumus:
C =x C standar ing endi
C yaiku isi glukosa ing conto eksperimen, mol / l,
Eop - Kapadhetan optik sampel,
Mangan - Kapadhetan optik saka sampel kalibrasi,
C standar - konten ing solusi kalibrasi, mol / l.
Nilai normal: bayi sing nembe lair - 2.8-4.4 mmol / l
bocah - 3.9 -5.8 mmol / l
wong diwasa - 3.9 - 6,2 mmol / l
Hipoglisemia (GHC).Tambah glukosa getih amarga akeh sebab, miturut rong klompok hiperglikemia dibedakake.
1. Insular - digandhengake karo insinyur sing ora cukup ing awak utawa amarga ora efisien tumindak.
2. Ekstrainsular (extrainsular) - ora gumantung saka pengaruh insulin.
Proses ing ngisor iki paling penting ing pembentukan HHC: tambah glikogen gondho, tambah neoglucogenesis, pencegahan sintesis glikogen, panggunaan glukosa jaringan mudhun ing pangaruh antagonis insulin hormonal: somatotropin, glukorticoid, thyroxine, thyrotropin.
Hiperlisemiaemia kacathet kanthi asupan glukosa sing gedhe banget ing getih (umpamane, hiperlisemia kanthi beban gula). "Hepatic" hiperglikemia ana ing rusak ati.
Hiperglikemia sing terus-terusan lan abot asring ngiringi diabetes. Minangka umume kanggo ngisolasi diabetes mellitus lan diabetes non-insulin sing gumantung karo insulin, utawa, yaiku jinis I diabetes mellitus lan diabetes mellitus jinis II. Pembentukan diabetes tipe I digandhengake utamane karo sintesis lan metabolisme cacat.
Klompok hiperglikemia kaloro digandhengake utamane karo hiperfungsi kelenjar endokrin sing ngasilake hormon - antagonis insulin. Iki diamati ing penyakit kayata sindrom lan penyakit Hisenko-Cushing, acromegaly, thyrotoxicosis, pheochromocytoma, glucoganoma. Tingkat glukosa getih mundhak kanthi penyakit ati tartamtu (utamane, ing pasien 10-30% pasien karo sirosis ati), hemochromatosis (sirosis ati sing duwe pigmen, diabetes tembaga).
Hipoglisemia (GPG) - nyuda glukosa getih - asring ana hubungane karo tingkat mutlak utawa relatif ing tingkat insulin ing getih. Hipoglikemia ekstrapreskritik kacathet minangka keruwetan ing antarane keruwetan proses glikogenolisis lan glyconeogenesis ing ati ing hepatitis akut lan kronis, sirosis, akrofi lan akut ati subakut, intoxication alkohol, keracunan karo arsenik, fosfor, karo penyakit paru-paru obstruktif sing dawa, kongestif . Penurunan konsentrasi glukosa getih asring diamati ing pasien sing nandhang kanker esofagus lan tumor ganas liyane saka lokal-pankreas (fibroma, fibrosarcoma, neuroma), uga muntah-muntah, anorexia, diabetes hepatik, uremia, lactation profosis lan glukosa ing wanita ngandhut.
Hogoglisemia bisa asale tengah amarga trauma mental, encephalitis, hemorrhage subarachnoid, tumor otak.
1. Kelainan puser pencernaan karbohidrat.
2. Apa jinis hiperglucoseemia sing ngerti sampeyan?
3. Apa sebab-sebab hiperlucoseemia patologis?
4. Apa sababe saka diabetes mellitus diabetes-gumantung?
5. Apa sebab-sebab biokimia penyakit keturunan: a) glikogenosis? b) aglikogenosis? c) fruktosemia? d) galaktosemia?
6. Apa owah-owahan biokimia metabolisme karbohidrat nalika pasa?
7. Prinsip cara kanggo nemtokake toleransi glukosa.
Nalika metode glukosa oksidase?
Tes iki digunakake kanggo ndeteksi toleransi gula cacat lan pangembangan prediabetes, uga ing dhuwur penyakit kasebut. Nanging kanggo tujuan kasebut, analisis jarang digunakake, iki amarga ana asil sing larang lan dawa banget. Paling asring, tekad glukosa ing getih lan urin nggunakake metode iki digunakake ing diagnosis diferensial kayata:
Gula wis suda langsung! Diabetes kanthi suwe bisa nyebabake macem-macem penyakit, kayata masalah penglihatan, kahanan kulit lan rambut, ulkus, gangren lan malah tumor kanker! Wong mulang pengalaman pahit kanggo normalake tingkat gula. maca ing.
- sindrom intoleransi laktosa,
- intoleransi fruktosa,
- sekresi fruktosa karo cairan awak,
- tambah konsentrasi pentose ing cipratan.
Kauntungan saka tes oksidase glukosa yaiku akurasi.
Apa dhasar saka cara iki?
Ana macem-macem cara kanggo nemtokake konsentrasi glukosa ing getih, nanging glukosa oxidase paling akurat. Adhedhasar kasunyatan manawa sajrone interaksi gula karo oksigen atmosfer, reagen kasebut dioksidasi. Hidrogen peroksida dibebasake menyang solusi. Zat iki berinteraksi karo orthotoluidine kanggo mbentuk senyawa berwarna. Kanggo prilaku reaksi iki, anané enzim khusus perlu. Sajrone reaksi oksidasi, oksidase glukosa kudu ana, lan nalika ngombe cairan, peroksida kudu ana. Intensitas warna solusi bakal gumantung marang konten glukosa lan bakal paling kuat babagan konten sing dhuwur.
Intine tekad glukosa oksidase
Asil evaluasi asil nggunakake cara kuantitatif fotometry sawise wektu sing padha. Wajib nggunakake solusi kalibrasi sing ngemot norma gula sing wis diwedharake lan, diwiwiti saka iku, sampeyan bisa ngadili konsentrasi glukosa ing cairan awak, asring ing getih.
Kepiye analisa?
Bahan dijupuk saka pasien ing weteng kosong. Kanggo tes, getih vena digunakake ing jumlah 5 ml. Ing wengi diagnosis, pasien dituduhake diet sing ketat. Iki bakal bisa kanggo ngadili linuwih saka asil lan ora bisa kesalahan kasalahan. 2 dina sadurunge njupuk getih, pasien kasebut kudu nglirwaake kebiasaan sing paling apik kanggo ngombe alkohol lan ngrokok. Sampeyan uga perlu kanggo mbatesi asupan panganan sing kepenak banget lan ngindhari kahanan stres kapan wae.
Kanggo njupuk plasma kanthi gula, getih wis dipusat.
Paling asring, cara iki kanggo nemtokake konsentrasi glukosa ditindakake kanthi centrifugation, sing mbentuk unsur diisolasi. Jumlah gula wis ditemtokake ing plasma. Yen kabeh reagen sing dibutuhake ditambahake, warna bisa diamati sawise 20 menit yen tes ditindakake ing suhu kamar. Kalkulasi glukosa ditindakake miturut jadwal kalibrasi utawa nggunakake aturan servings.
Reagen Panaliten
Kanggo nemtokake gula, luwih trep nggunakake metode ekspres kanggo nemtokake glukosa ing getih. Iki amarga gampang digunakake lan asil cepet. Kajaba iku, pasien ora perlu menyang laboratorium utawa rumah sakit. Nanging ora padha karo tes glukosa oksidase, diagnosis kasebut ora bisa dipercaya. Amarga ora mbedakake glukosa saka gula liyane lan nemtokake konsentrasi bebarengan.
Dhasar reaksi glukosa oksidase yaiku larutan natrium klorida 9% lan seng sulfat 50%. Iki ditambahake ing tahap centrifugasi getih. Kajaba iku, solusi buffer karo asam asetat lan sodium asetat digunakake. Cara titrasi nemtokake pH ing 4,8. Sawise iku, oksidasi glukosa ditambah, amarga hidrogen peroksida lan peroksida dibebasake, sing melu solusi ing konsentrasi sing dikarepake kanggo entuk asil sing akurat.
Norma ing analisis
Takeran gula ditindakake ing unit khusus - milimeter saben liter.
Tes getih glukosa oxidase prentah ing weteng kosong lan nggunakake plasma utawa serum kanggo iki. Norma jumlahe kanggo wong diwasa kanggo wanita lan pria yaiku 3.3-5.5. Kanggo bocah sing umure 15 taun, angka iki rada ngisor lan kisaran saka 3.2-5.3. Ing bayi sing anyar, glukosa getih ana 1,7-4.2. Peningkatan pratondho diamati karo pasien pasien diabetes mellitus utawa kanthi toleransi glukosa mboten saget. Kondisi kasebut minangka prediabetes, lan yen ora diobati kanthi tepat, mula bakal nyebabake perkembangan patologi abot iki.
Apa isih ora bisa ngobati diabetes?
Kang menehi kritik manawa sampeyan lagi maca baris iki, kamenangan kanggo nglawan gula getih sing dhuwur durung ana.
Lan sampeyan wis mikir babagan perawatan rumah sakit? Bisa dingerteni, amarga diabetes minangka penyakit sing mbebayani banget, sing, yen ora ditambani, bisa nyebabake pati. Ngelak terus, urination kanthi cepet, penglihatan kabur. Kabeh gejala kasebut wis luwih kenal karo sampeyan.
Nanging apa bisa nambani sabab tinimbang efek kasebut? Disaranake maca artikel babagan perawatan diabetes saiki. Waca artikel >>