Produksi insinyur insinyur genetik

Insulin - hormon pankreas sing ngatur | metabolisme karbohidrat lan njaga tingkat normal cazdpaing getih. Kurang saka hormon iki ing awak ndadékaké.) Kanggo salah sawijining penyakit sing paling serius - diabetes, sing, minangka panyebab pati, ana ing papan kaping telune sawise penyakit kanker lan kanker. Insulin minangka globule cilik | protein sing ngemot 51 residu asam amino lan dumadi saka rong rantai polypeptide sing digandhengake karo rong jembatan disulfida. Sintesis ing bentuk prekursor janin tunggal chain, preproinsulin, ngemot koi peptida sinyal tengah (23 résidu asam amino) lan sambungan sambung peptida 35-link (C-peptide). Nalika peptida sinyal dicopot, proinsulin saka 86 residu asam amino dibentuk ing sel, ing njero rantaian A lan B insulinC-neitweed, sing nyedhiyakake orientasi sing dibutuhake ing $ 3 ing ikatan disulfida. Sawise detasmen proteolitik saka peptida C, insulin dibentuk.

Sawetara macem diabetes dikenal. Bentuk sing paling abot, kanggo perawatan sing pasien mbutuhake insulin (bentuk penyakit sing gumantung karo insulin), disebabake dening sel-sel sel sing nyintesis hormon iki (sel-sel pulo Langerhans ing pankreas). Bentuk diabetes mellitus, sing kudu diobati karo insulin, luwih umum, bisa dikelola kanthi bantuan diet sing cocog lan re:> ma. Biasane, pankreas sapi lan sapi ora digunakake ing industri daging lan komplotan lan dilebokake ing gerbong sing digawe kanggo perusahaan farmaseutikal sing dijupuk ekstraksi hormon. Kanggo entuk 100 g cr! Insulin Thallic mbutuhake feed feed 800-1000 kg

Sintesis loro chain lan sambungan ikatan disudfid kanggo njupuk insulin ditindakake ing taun 1963 lan 1965. telung tim riset ing AS, China lan Jerman. Ing taun 1980, perusahaan Denmark Novo Industri ngembangake metode kanggo ngowahi babi babi menyang insulin manungsa kanthi ngganti sisa residu alanine 30 ing chain B kanthi sisa ampuh threonine. Loro-lorone insulin ora beda karo kegiatan lan durasi tumindak.

Pakaryan teknik genetik insulin wiwit 20 taun kepungkur. Ing 1978, ana pesen babagan produksi galur Escherichia coli sing ngasilake proinsulin tikus (AS). Ing taun sing padha, rantai insulin manungsa disintesis kanthi ekspresi gen sintetik ing sel.Êngg.coli(Gambar 5.11). Saben gen sintetik sing diperolehi ditrapake menyang ujung gen enzim 3'(3-galactosidase lan dikenalake ing plasmid vektor(pBR322).SelÊngg.colidiowahi karo plasmid rekombinan kaya, protein hibrida (chimeric) diprodhuksi dumadi saka fragmen p-galactosidase lan peptide insulin A utawa B sing dilampirake liwat residu methionine. Nalika ngolah protein krimerik kanthi bromida sianogen, peptida dibebasake. Nanging, tutup kreteg disulfida ing antarane chain insulin sing dibentuk angel.

Ing taun 1981, analog pro-insulin, mini-C-pro-insulin, disintesis ing C-peptida 35-unit diganti dening segmen enem asam amino: arg-arg-gly-ser-lys-arg lan ekspresi kasebut ditampilake ingÊngg.coli.

Ing taun 1980, W. Gilbert lan kanca-kancane ngisolasi mRNA insulin saka tumor P-sel tikus tikus lan entuk cDNA saka iku kanthi nggunakake transcriptase. Asil cDNA wis dipasang ing plasmidpBR322Êngg.coliing sisih tengah gen penisilin. Plasmid rekombinan ngemot informasi babagan struktur proinsulin.Minangka asil saka terjemahan mRNA, protein Sato disintesis ing sel sing ngemot urutan penisilin lan proinsulin, sing dicerna karo trypsin saka protein kaya kasebut.

Ing taun 1978, karyawan Institut Kimia Bioorganik sing ana ing pengawasan Acad. Yu. A. Ovchinnikov, rong gen struktural ngodhe sintesis neuropeptida disintesis:leucine- enkephalin lan bradykinin.Génus leucine enkephalin sing disintesis duwe rong "lengket" pungkasan:

Gén sintetik sing diasilake ditambah karo fragmen DNA alami sing ngemot promotor lan bagean proksimal saka gen protein E. coli P-galactosidaseÊngg.colimenyang plasmid

Entuk insulin, metode teknik genetik, Bioteknologi - Kursus

1. Struktur lan fungsi insulin 5

1.1. Struktur molekul insulin 5

1.2. Intine biologis insulin 7

1.3. Inosis sintesis 8

2. sintesis insinyur insinyur genetik 10

2.1. Panganggone metode teknik genetik kanggo sintesis obat 10

2.2. Metode Teknik Genetik 11

2.3. Produksi insinyur insinyur genetik 14

Kutipan saka teks

Kajaba iku, komponen kasebut bisa uga ana bebarengan kanthi komposisi protein hibrida. Kajaba iku, nalika nggawe protein hibrida, prinsip multidimensionality bisa digunakake - anané sawetara salinan polipeptida target ing protein hibrida, sing bisa nambah paningkatan prodhuk target.

Ing Inggris, loro lembar insulin manungsa disintesis nggunakake E. coli, disambungake menyang molekul hormon aktif biologis. Supaya organisme uniselular nggawe sintesis molekul insulin ing ribosom, perlu diwenehake karo program sing dibutuhake, yaiku, ngenalake gen hormon kasebut.

Insulin rekombinan ditemokake ing Institut Akademi Ilmu Rusia nganggo galur direktur genetik E. coli. Protein prekursor hibrid ditulis saka biomas, sing wis ditulis kanthi jumlah

40. saka total protein sel sing ngemot preproinsulin.

Konversi kanggo insulin in vitro ditindakake kanthi urutan sing padha karo ing vivo - polipeptida sing utama wis dibersih, preproinsulin diowahi dadi insulin liwat tahap sulfitolisis oksidatif, disusuli karo penutupan reduktif saka telung ikatan disulfida lan enzim enzim saka naleni C-peptide. Sawise pirang-pirang sisan pertukaran ion, gel lan HPLC kromatografi, insulin manungsa saka kemurnian lan kegiatan alami dipikolehi.

Kanggo njupuk insulin, galur digunakake kanthi urutan nukleotida sing dipasang ing plasmid ngatonake protein hibrid sing dumadi saka proinsulin linear lan fragmen protein Staphylococcus aureus: A ditempelake ing N-terminus liwat residu methionine 8, 9, 10.

Pengembangan biomas saturated sel galangan rekombinan nyedhiyakake wiwitan produksi protein hibrida, pengasingan lan transformasi urutan sing ana ing tabung nyebabake insulin.

Cara liya uga bisa: entuk sistem ekspresi bakteri saka protein rekombinan sing dumadi saka proinsulin manungsa lan buntut polyhistidine sing dilampirake liwat residu methionine. Diisolasi nggunakake kromatografi chelate ing kolom kanthi cleavage Ni-agarose lan bromine.

Protein terisolasi yaiku S-sulfonated. Pemetaan lan analisa spektrometrik massa sing diresiki dening proinsulin sing diresiki dening kromatografi pertukaran ion ing resin ijol-ijolan anion lan RP (fase terbalik) kromatografi cair kinerja dhuwur nuduhake anané jembatan disulfida sing cocog karo jembatan disulfida saka proinsulin manungsa asli.

Bubar, manungsa waé kanthi rinci wis diwiwiti kanggo nggawe prosedur kanggo ngasilake insulin rekombinan kanthi teknik genetik.Dadi, umpamane, sampeyan bisa entuk protein sing ngemot proinsulin sing dipasang ing N-terminus liwat residu lysine peptide pimpinan interleukin

2. Protein kasebut sacara efektif diwartakake lan dilokalisasi ing awak sing kalebu. Sawise diisolasi, protein kanggo ngasilake insulin lan C-peptida dibungkus nganggo trypsin 5, 8, 10.

Insulin lan C-peptida sing diasilake diresiki RP-HPLC. Penting banget nalika nggawe struktur sekring yaiku rasio massa protein operator lan polipeptida target.

C-peptida kanthi bantuan spacer asam amino sing nggawa situs Watesan Sfi I lan residu arginine ing wiwitan lan ing pungkasan spacer kanggo pencernaan trypsin protein sakteruse disambungake miturut prinsip kepala sirah.

HPLC produk cleavage nuduhake yen cleavage C-peptide terus kanthi jumlah, lan iki ngidini panggunaan gen sintetik multimerik ngasilake polipeptida target ing skala industri.

Kesimpulan

Radikal, lan ing paling kasus, cara mung kanggo njaga urip lan kapasitas pasien pasien diabetes mellitus saiki, insulin.

Sadurunge nampa lan ngenalake insulin menyang praktik klinis, asil mbebayani samesthine sajrone siji utawa rong taun wiwit wiwitan penyakit pasien diabetes tipe I, sanajan nggunakake diet sing paling debit.

Pasien diabetes tipe I butuh terapi gantian umur kanthi persiapan insulin. Gencatan administrasi insulin biasa kanthi siji alesan utawa liyane nyebabake pangembangan komplikasi kanthi cepet lan matine pasien kanthi cepet.

Saiki, prevalensi diabetes ana ing kaping telune sawise penyakit sistem kardiovaskular lan tumor ganas. Prevalensi diabetes ing antarane wong diwasa, miturut Organisasi Kesehatan Dunia, ing meh kabeh wilayah ing donya 2-5% lan cenderung nambah saben

1. taun jumlah pasien meh tikel kaping pindho. Jumlah pasien sing gumantung karo insulin, sanajan ana ing proses kesehatan, saya tambah saben taun, lan saiki ana ing Rusia mung kira-kira 2 yuta wong.

Cara sing paling njanjeni kanggo ngasilake insulin yaiku metode teknik genetik. Insinyur insinyur genetik dijupuk kanthi nggawe rantai A lan B kanthi nggunakake galur produsen beda lan lipatan molekul sing sabanjure, disusul pemisahan isoform, lan sintesis proinsulin ing sel E. Coli kanthi cleavage karo trypsin lan carboxypeptidase lan produksi insulin asli.

Perkembangan persiapan insan insinyur insinyur genetik domestik mbukak kemungkinan anyar kanggo ngrampungake akeh masalah diabetes diabetes supaya bisa nylametake mayuta-yuta wong diabetes.

Sastra

Balabolkin M.I., Klebanova E.M., Kreminskaya V.M. Diabetes mellitus: aspek diagnosis diagnosis lan perawatan / Dokter, ed. G.L.

Gavrikov, A.V. Optimisasi produksi bioteknologi saka interferensi rekombinan manungsa: dis. ... lilin. biji. Ilmu - M, 2003

Insulin insinyur insinyur gen. Ningkatake efisiensi pamisahan kromatografi kanthi nggunakake prinsip bifunctional. / Romanchikov A.B., Yakimov S.A., Klyushnichenko V.E., Arutunyan A.M., Wulfson A.N. // Bahan Bioorganik Kimia, 1997 - 23, No

Glick B., Pasternak J. Ngontrol panggunaan metode bioteknologi // B. Glick, J. Parsnip / Bioteknologi Molekular = Bioteknologi Molekular. - M. Mir, 2002 .-- S. 517-532. - 589 p.

Glick B., Pasternak J. Biotéhnologi molekular. Prinsip lan aplikasi. M .: Mir, 2002.

Davis R., Botstein D, Roth J. Metode teknik genetik. Genetika bakteri // R. Davis, D. Botstein, J. Roth / Per. saka Inggris.-M .: Mir. - 1984.- 176 p.

Ermishin A.P.Organisme sing Diwenehi sacara Genetik: Mitos lan Kasunyatan / A.P. Ermishin // Mn .: Tekhnalogaliya.- 2004. - 118 p.

Dasar Bioteknologi Farmasi: Buku Teks / TP Prischep, V.S. Chuchalin, K.L. Zaykov, L.K. Mikhaleva. - Rostov-on-Don .: Phoenix, Tomsk: Nerbit Publishing House, 2006.

Patrushev L.I. Sistem genetik buatan. // L.I. Patrushev / M .: Nauka.- 2004.

Romanchikov, A.B. Insulin insinyur insinyur gen. Ningkatake efisiensi pamisahan kromatografi kanthi nggunakake prinsip bifunctional. / A.B. Romanchikov lan liya-liyane.

// Kimia Bioorganik. 1997. No 2. p. 23

Rybchin V.N. Dhasar Teknik Genetik // V.N. Rybchin / 2nd ed., Diubah. lan nambah .: Buku teks kanggo universitas. SPb .: Griya terbitan SPbSTU. - 2002 .-- 522 s.

Schelkunov S. N. Teknik genetik // Schelkunov S. N. / Novosibirsk: Sib. univ. House Publishing.

Schelkunov, S.N. Teknik genetik: buku teks. sangu. - 2, ed., Pdt. lan nambah. - Novosibirsk: Sib. univ. House Publishing, 2004 .-- 496 p.

1. Lokasi ikatan disulfida ing molekul insulin.

2. Tata letak residu asam amino ing molekul insulin

Efek insulin ing enzim metabolik utama

Otot Atip Adipose: Ngaktifake 1. Phosphodiesterase 1. Phosphodiesterase 1. LP-lipase

4. Kompleks dehidrogenase pyruvate

4. Kompleks dehidrogenase pyruvate

5. Sintropase fosfatase glikogen lan fosforil glikogen

5. fosfatase glikogen b. Induksi Acetyl-CoA-carboxylase 1. Glucokinase 1. Glyceraldehida fosfat dehidrogenase

6. Reproduksi glukosa-6-fosfat dehidrogenase Fosphoenolpyruvate carboxykinase

Gambar. 3 Skema biosintesis insulin ing β-sel pulo Langerhans. ER - reticulum endoplasmic. 1 - pembentukan peptida sinyal, 2 - sintesis preproinsulin, 3 - ngilangi peptida sinyal, 4 - transportasi proinsulin menyang apparatus Golgi, 5 - konversi proinsulin dadi insulin lan C-peptide lan inklusi insulin lan C-peptide menyang butiran rahasia, 6 - sekresi insulin. lan C peptide.

4. Skema umum kanggo sintesis insulin saka sing sadurunge

Gambar. 5 Sintesis insulin kanthi pembentukan rong rantai kapisah

Cara njupuk insulin insinyur insinyur gen

Penemuan kasebut ana hubungane karo bidang bioteknologi, lan utamane kanggo produksi insinyur insinyur insinyur gen kanggo nggawe obat-obatan sing digunakake kanggo perawatan diabetes mellitus.

Cara kasebut ditindakake kanthi ngolah saringan produser protein hibrid sing ngemot proinsulin manungsa, Escherichia coli BL21 / pPINS07 (BL07) utawa Escherichia coli JM109 / pPINS07, ngganggu sel kanthi disintegrasi, misahake awak inklusi sing ngemot protein hibrida.

Sabanjure, ngumbah awak inklusi awal, nyisihake protein lan mulihake ikatan disulfida ing buffer kanthi dithiothreitol 5-10 mM lan 1 mM EDTA ditindakake, renaturasi lan purifikasi protein fusi sing didesain kanthi kromatografi pertukaran pertukaran.

Pembuangan protein hibrida ditindakake kanthi hidrolisis gabungan trypsin lan carboxypeptidase B kanthi rasio bobot saka protein hibrid, trypsin lan carboxypeptidase B 4000: 0.6: 0.9.

Pemurnian insulin ditindakake dening kromatografi hidrofobik utawa fase kromatografi kanthi cairan sing dibalik kanthi dhuwur, lan filtrasi gel, lan ngisolasi insulin kanthi crystallization ing ngarsane uyah seng. Penemuan kasebut bisa nyuda proses entuk insinyur insinyur insinyur genetik lan nambah output.

Penemuan kasebut ana hubungane karo bidang bioteknologi, lan utamane kanggo produksi insinyur insinyur insinyur gen kanggo nggawe obat-obatan sing digunakake kanggo perawatan diabetes mellitus.

Nyathet prestasi utama diabetes diabetes modern lan rekomendasi Organisasi Kesehatan Dunia, negara-negara Eropa ing taun 2001 ngrampungake transisi kanggo nggunakake insulin manungsa. Ing babagan iki, pangembangan cara ngasilake insulin nggunakake metode teknologi rekombinan DNA minangka tugas sing penting.

Cara sing dikenal kanggo ngasilake insinyur insinyur insinyur gen, yaiku kasusun saka tanduran produser E. Coli ngasilake proinsulin, ngemot urutan rong domain naleni IgG sintetik protein staphylococcal.

Cara kasebut kalebu kanggo ngrusak sel bakteri, entuk inklusi Taurus sing ngemot proinsulin, lebokake inklusi Taurus, sulfitolysis oksidatif proinsulin, renapanasi, purifikasi protein sing diresmik kanthi kromatografi pangiringan, ngresiki Proinsulin karo enzim proteolitik (trypsin lan carboxypeptidase B) lan fase purifikasi kanthi kapinteran sing dhuwur. kromatografi (Nilson J., Jonasson P., Samuelsson E., Stahl S., Uhlen M. "Produksi integral ing insulin manungsa lan C-peptide", Jurnal bioteknologi, 1996, v. 48, p. 241-250) .

Kerugian metode iki yaiku biaya produk sing dhuwur lan panggunaan ing produksi deterjen insulin, sing bisa uga ana ing produk target.

Cara sing dikenal kanggo ngasilake insinyur insinyur insinyur gen, yaiku kasusun ing budaya sel produser.

Coli DN5 a / pVK100, ngrusak sel bakteri kanthi disintegrasi ultrasonik, badan penyebaran sing kapisah ngemot protein hibrida saka impat sing larut banyu kanthi sentrifugasi, ngilangake awak sing kalebu ing buffer sing ngemot 8 M urea, 1 mM dithiothreitol, 0,1 M Tris-HCl, PH 8.0, kanggo 12-16 jam.

Kotor sing ora larut dicopot kanthi sentrifugasi, sawise konsentrasi dithiothreitol ditambahake dadi 10 mM lan ikatan disulfida dibalekake maneh ing suhu 37 ° C kanggo 1 jam. Solusi sing diencerake kaping 5 kanthi banyu adhem, diatur pH 4,5 lan dielem 2 jam ing 4 ° C kanggo nggawe endapan.

Wetter sing ngemot protein hibrida dipisahake karo centrifugation lan digawe kanthi cepet, kanthi cepet larut ing banyu adhem kanthi ukuran pH 10-12, sawise iku diencerake nganggo 10 buffer glycine, pH 10.8, lan terus nganti 4 ° C sewengi. Sawise ultrafiltrasi, solusi kasebut diaplikasi filsasi gel ing kolom Sephadex G-50 lan dijotosi kanthi 10 mM glikol.

Fraksi sing ngemot protein gabungan dikumpulake, pungkasan, lan garing beku. Protein fusi sing diasilake dibubarake ing 0.08 M Tris-HCl buffer, pH 7.5, kanthi konsentrasi 10 mg / ml lan diluncurake bebarengan karo trypsin lan carboxypeptidase B (rasio karboksypeptidase B: trypsin: protein fusion 0.3: 1: 10) ing 37 ° C suwene 30 menit.

Banjur tambah isopropanol nganti 40%. Campuran kasebut dikromotik ing kolom DEAE-Sephadex A-25 lan dihiasi karo buffer 0,05 M Tris-HCl, pH 7.5 kanthi isopropanol 40% kanthi kecerunan linear natrium klorida saka 0 nganti 0.1 m. Sawise mbusak isopropanol, konsentrasi natrium klorida mundhak dadi 25%, ganti pH dadi 2,0 lan kumpulake endapan insulin.

(Chen J.-Q., Zhang H.-T., Hu M.-N., Tang J.-G., "Produksi insulin manungsa ing sistem E. Coli karo proinsulin met-lys-human minangka sing dicritakake prekursor "Biochemistry Applied and Biotechnology, 1995, v. 55, p. 5-15).

Kerugian cara iki kalebu nggunakake filtrasi gel ing tahap wiwitan, sing mbutuhake jumlah sorbent sing signifikan lan jumlah enzim sing digunakake ing cleavage protein hibrida.

Cara sing dikenal kanggo ngasilake insinyur insinyur insinyur genetik, kalebu ngolah galur produser Escherichia coli JM109 / pPINS07, ngrusak sel bakteri kanthi disintegrasi, misahake awak inklusi sing ngemot protein Sato, mbuwang ing buffer sing ngemot urea lan dithiothreitol, renaturasi, lan pemurnian protein sing diowahi. udan senyawa sing ora rusak ing isopropanol 40% ngiring dening kromatografi ing KM-sepharose, panguripan urut karo trypsin lan carboxypeptidase B, dene produk trypsinolysis chromatographed ing SP-Sepharose, disamakan karo 0,03-0.1 M amonium asetat buffer pH 5.0-6.0 ngemot 6 M urea, kanthi elusi protein kanthi garis lambung natrium klorida saka 0 nganti 0.5 M ing wiwitan buffer, lan pecahan insulin sing dijupuk sawise cleavage karo karboksypeptidase B diresiki kanthi kromatografi cairan kinerja fase tinggi (RP HPLC) sing diikuti dening filtrasi gel (Pat. RF Nomer 2141531, MKI C12P 21/02, diterbitake. 1999)

Kerugian metode kasebut kalebu panggunaan jumlah urea lan pelarut organik ing tahap pemurnian protein hibrida.

Pakar diabetes

Sadurunge nggunakake insulin, harapan urip pasien karo diabetes mellitus ora luwih saka 10 taun. Penemuan obat iki wis nylametake mayuta-yuta pasien. Insulin insinyur genetik manungsa minangka kemajuan paling anyar ing ilmu.

Asil pirang-pirang taun kerja keras

Sadurunge penemuan persiapan teknik genetika (rekombinan), insulin diisolasi saka pankreas sapi lan babi.

Bentenane karo insulin porcine lan manungsa mung siji asam amino

Kerugian cara iki kanggo njupuk tamba:

• kerumitan panyimpenan lan transportasi bahan mentah biologis,
• kurang ternak
• kangelan sing ana gandhengane karo alokasi lan pemurnian hormon pankreas,
• risiko reaksi alergi sing dhuwur.

Kanthi sintesis insulin manungsa alami ing bioreactor ing 1982, jaman bioteknologi anyar wiwit. Yen ing wayah esuke terapi insulin, target para ilmuwan mung kaslametan pasien, ing wektu kita pangembangan obat-obatan anyar dituju kanggo entuk ganti rugi sing tetep kanggo penyakit kasebut. Tujuan utama riset ilmiah yaiku nambah kualitas urip pasien diabetes.

Teknologi modern

Jinis obat, gumantung karo metode persiapan:

Apa sing kedadeyan ing awak sawise administrasi narkoba?

Nyambung karo reseptor membran sel, insulin dadi kompleks sing ngetrapake proses ing ngisor iki:

1. Mbenakake transportasi glukosa intraselular lan nggampangake panyerapan.
2. Ndhukung pembebasan enzim sing melu proses glukosa.
3. Nyuda tingkat pembentukan glikogen ing ati.
4. Ngrangsang metabolisme lemak lan protein.

Ing kasus administrasi subkutan, insulin wiwit tumindak ing 20-25 menit. Dadi tamba saka 5 nganti 8 jam. Iki luwih disingkirake dening insulinase enzim lan diekskresi ing urin. Obat kasebut ora ngliwati plasenta lan ora mlebu susu ibu.

Nalika diwenehi insinyur insinyur insulin?

Yen njaluk bantuan penting

Insulin insinyur insinyur genetik digunakake ing kasus ing ngisor iki:

1. Diabetes jinis 1 utawa jinis 2. Iki digunakake minangka perawatan mandiri utawa nggabungake obat liyane.
2. Kanthi resistensi agen hipoglikemik oral.
3. Kanthi diabetes ing wanita ngandhut.
4. Ing kasus komplikasi saka ginjel lan ati.
5. Nalika ngalih menyang insulin-tumindak sing berpanjang.
6. Ing wektu preoperative.
7. Ing kahanan sing bisa ngancam nyawa (hyperosmolar utawa ketoacidotic koma).
8. Ing kahanan darurat (sadurunge nglairake anak, kanthi ciloko).
9. Yen ana lesi kulit degeneratif (ulkus, furunculosis).
10. Perawatan diabetes nglawan latar mburi infeksi.

Insulin insinyur genetik manungsa bisa uga ditolak lan ora nyebabake reaksi alergi, amarga wis rampung padha karo hormon alami.

Pemantauan terus penting!

Dilarang kanggo resep obat ing kasus:

• ngedhunake gula getih
• hipersensitifitas tamba.

Ing dina-dina pisanan sawise janjian obat kasebut, kudu ngawasi pasien kanthi ati-ati.

Efek samping

Bahaya Urtikaria! Edema Quincke!

Ing kasus langka, nalika nggunakake insulin, komplikasi ing ngisor iki bisa ditindakake:

• reaksi alergi (urtikaria, edema Quincke, gatal-gatal saka kulit),
• pengurangan gula getih (berkembang amarga nolak tamba dening awak utawa yen ana konflik imunologis),
• eling mboten saget
• ing kasus abot, pangembangan koma hipoglikemik,
• ngelak, tutuk garing, lesu, kelangan napsu,
• hiperlisemia (nalika nggunakake obat kanggo infeksi utawa demam),
• rai abang
• reaksi lokal ing wilayah administrasi (ngobong, gatel, atrofi utawa proliferasi lemak subkutan).

Kadhangkala adaptasi kanggo obat kasebut disertai gangguan kayata bengkak lan gangguan visual. Manifestasi kasebut biasane ilang sawise sawetara minggu.

Kepiye cara nemokake insinyur insinyur insulin ing apotek?

Obat kasebut kasedhiya ing solusi kanggo administrasi parenteral:

Ora angel milih persiapan insulin kanthi nganggep ciri-ciri individu sing sabar.

Katemtuan panggunaan

Paling asring, administrasi subkutan ing insulin digunakake.

Ing kasus-kasus mendesak, obat kasebut ditrapake sacara intravena.

Ing kahanan pasien abot

Malah diabetes sing ngalami pengalaman bisa nggawe kesalahan nalika nggunakake obat kasebut.

Kanggo ngindhari komplikasi, perlu:

1. Sadurunge nggunakake, priksa tanggal kadaluwarsa obat kasebut.
2. Mirsani rekomendasi panyimpenan: Tutup spion kudu disimpen ing kulkas. Vial sing dikembangake bisa disimpen ing suhu ruangan ing papan sing peteng.
3. Mesthi elinga dosis sing bener: waca resep dhokter maneh.
4. Sadurunge suntik, priksa udhara saka suntik.
5. Kulit kasebut kudu resik, nanging ora dienggo nggunakake alkohol kanggo diproses, amarga nyuda efektifitas obat kasebut.
6. Pilih papan sing paling apik kanggo injeksi. Yen ditepungi ing kulit weteng, obat kasebut bakal tumindak luwih cepet. Penyerapan insulin sing luwih alon nalika dikenalake menyang lip utawa pundhak gluteal.
7. Gunakake wilayah ing saindhenging permukaan (nyegah komplikasi lokal). Jarak antarane injeksi kudu paling sethithik 2 cm.
8. Genggeman kulit ing jambangan kanggo nyuda resiko kanggo mlebu ing otot.
9. Nyuntikake jarum suntik ing kulit kanthi sudhut supaya obat kasebut ora bocor.
10. Nalika disuntikake ing weteng, insulin tumindak cendhak diwenehake 20 menit sadurunge dhahar. Yen sampeyan milih pundhak utawa bokong - telung puluh menit sadurunge mangan.

Kombinasi karo obat liyane

Asring karo diabetes, pasien njupuk sawetara obat. Kombinasi karo obat liyane bisa mengaruhi efek terapi saka insinyur insinyur gen.

Kanggo nyegah komplikasi, sampeyan kudu ngerti:

Overdosis

Ing sawetara kasus, administrasi insulin nyebabake nyuda gula getih kanthi dadakan. Masalah asring timbul amarga pilihan dosis sing ora bener.

Gejala awal hipoglisemia:

• kekirangane
• kulitipun kulit
• kahanan kuatir
• pusing
• nguciwani
• mati rasa lengen, sikil, ilat lan lambe,
• perangan awak sing gemeter
• kringet adhem
• raos keluwen kuwat
• ngelu.

Tremor; rusak mudhun ing kesejahteraan

Yen sampeyan mirsani gejala kaya kasebut ing awake dhewe, kudu cepet mangan sing ngemot karbohidrat sing gampang dicedakake. Bisa dadi cookie, permen, roti utawa roti putih. Teh manis mbantu ing kahanan kaya ngono.

Yen kahanan saya surem, sampeyan kudu nelpon ambulans. Hipoglisemia bisa nyebabake koma utawa matine pasien.

Apa insulin rekombinan uga mbebayani?

Halo Insulin rekombinan ora beda karo alam. Kanggo entuk, bakteri sing diowahi gen digunakake.

Nganggo teknologi rekayasa genetik, DNA rekombinan sing ngemot gen insulin kasebut dilebokake menyang sel E. coli. Organisme gen sing wis genah tikel lan ngasilake hormon. Obat kasebut banget efektif lan duwe dimurnia kanthi derajat.

Insulin Bagean II Produksi insulin mikrobiologis

komponèn pangambungan - ndadékaké pamisahan saka protein hibrida.

Ing kasus iki, komponen kasebut bisa bebarengan bebarengan ing komposisi protein hibrida.

Kajaba iku, nalika nggawe protein hibrid, prinsip multidimensionality bisa digunakake (yaiku, sawetara salinan polipeptida target wis ana ing protein hibrida), sing bisa nambah paningkatan prodhuk target.

2 Ekspresi proinsulin ing sel E. coli ..

Ing karya kasebut, panulis nggunakake galur JM 109 N1864 kanthi urutan nukleotida sing dipasang ing plasmid nyatakake protein hibrida, sing kasusun saka proinsulin linear lan fragmen protein Staphylococcus aureus A sing dipasang ing N-terminus liwat residu methionine.

Pengembangan biomas saturated sel galangan rekombinan nyedhiyakake wiwitan produksi protein hibrida, pengasingan lan transformasi urutan sing ana ing tabung nyebabake insulin.

Klompok peneliti liyane entuk protein rekombinan ing sistem ekspresi bakteri saka gabungan sing dumadi saka proinsulin manungsa lan buntut polyhistidine sing dilampirake liwat residu methionine. Iki diisolasi kanthi nggunakake kritis kratografi ing kolom Ni-agarose saka awak inklusi lan dicerna karo bryanida sianogen.

Pemetaan lan analisa spektrometrik massa sing diresiki dening proinsulin sing diresiki dening kromatografi pertukaran ion ing resin ijol-ijolan anion lan RP (fase terbalik) HPLC (kromatografi cair kinerja dhuwur) nuduhake anané jembatan disulfida sing cocog karo jembatan disulfida saka proinsulin manungsa asli. Kertas kasebut nglaporake pangembangan metode anyar sing apik kanggo ngasilake insan insan kanthi teknik genetik ing sel prokaryotik. Penulis nemokake yen asil insulin ing struktur lan kegiatan biologis padha karo hormon sing diisolasi saka pankreas.

Bubar, manungsa waé kanthi rinci wis diwiwiti kanggo nggawe prosedur kanggo ngasilake insulin rekombinan kanthi teknik genetik. Dadi, panulis entuk protein fusi sing dumadi saka peptide pimpinan interleukin 2 sing dipasang ing N-terminus proinsulin liwat residu lysine.

Protein kasebut sacara cekap diandharake lan dilokalisasi ing awake dhewe. Sawise diisolasi, protein kasebut dicerna nganggo trypsin kanggo ngasilake insulin lan C-peptide. Klompok peneliti liyane tumindak kanthi cara sing padha.

Protein gabungan sing kalebu proinsulin lan rong domain sintetis staphylococcus: A protein sing naleni IgG dilokalisasi ing badan sing kalebu, nanging nduwe tingkat ekspresi sing luwih dhuwur. Protein diisolasi karo kromatografi karemenan nggunakake IgG lan diolah nganggo trypsin lan carboxypeptidase B.

Insulin lan C-peptida sing diasilake diresiki RP RP. Nalika nggawe struktur sekring, rasio massa protein operator lan polypeptide target penting banget.

Dadi, karya kasebut nerangake babagan struktur fusi, ing endi albumin serum manungsa sing protein bisa digunakake minangka polypeptide operator. Siji, telu lan pitu C-peptides dipasang ing.

C-peptida disambungake kanthi dhasar sirah nganggo spacer asam amino sing nggawa situs larangan Sfi I lan rong residu arginine ing wiwitan lan ing pungkasan spacer kanggo pamisah protein sakteruse karo trypsin. HPLC produk cleavage nuduhake yen cleavage C-peptide minangka kuantitatif, lan iki ngidini panggunaan gen sintetik multimerik entuk polipeptida target ing skala industri.

Pakaryan nggambarake persiapan mutan proinsulin, sing ngemot panggantos Arg32Tyr. Nalika protein iki dikepengini karo trypsin lan carboxypeptidase B, insulin asli lan C-peptida sing ngemot residu tirosine dibentuk. Sing terakhir, sawise menehi label 125I, aktif digunakake ing radioimmunoassay. 3 Purifikasi insulin.

Insulin sing dimaksud kanggo ngasilake obat kudu resik. Mula, kontrol kesucian efektifitas produk sing dipikolehi ing saben tahap produksi perlu. Sadurunge, RP lan IO (tukar ion) HPLC digunakake kanggo menehi ciri proinsulin-S-sulfonate, proinsulin, A-lan B-chain, lan S-sulfonates.

Perhatian khusus uga dibayar kanggo turunan insulin neon. Ing karya kasebut, panulis nyinaoni babagan panggunaan lan informatif cara kromatografis ing analisis produk ing kabeh tahapan produksi insan lan nggawe jadwal operasi kromatografi kanggo sacara efektif misahake lan menehi ciri produk.

Kajaba iku, pendekatan dikembangake kanggo ngotomatisasi lan nyepetake proses kanggo nemtokake kesucian lan jumlah insulin.

Kertas kasebut nglaporake studi babagan kemungkinan nggunakake kromatografi cairan RP kanthi deteksi elektrokimia kanggo netepake insulin, lan metodologi kanggo netepake insulin sing diisolasi saka isine Langerhans kanthi kromoografi immunoaffinitas kanthi deteksi spektrometrik dikembangake.

Ing karya kasebut, kemungkinan nggunakake determinasi mikro kanthi cepet insulin nggunakake elektroforesis kapiler karo deteksi laser-fluoresensi. Analisa ditindakake kanthi nambah conto jumlah insulin sing dikepengini kanthi phenylisothiocyanate (FITC) lan potongan antibodi insulin monoklonal. Plugins lan label insulin biasa saingan karo kompleks Fab. Insulin sing label label FITZ lan kompleks karo Fab kapisah ing 30 detik.

Paling anyar, sawetara karya sing wis dikhususake kanggo ningkatake metode kanggo ngasilake insulin, uga nggawe formulir dosis adhedhasar.

Contone, ing Amerika Serikat, analogi hepatospecific dipaten, sing beda struktural beda karo hormon alami amarga introduksi residu asam amino beda ing posisi 13-15 lan 19 saka rantai A lan ing posisi 16 saka rantai B.

Analog sing dijupuk digunakake minangka bagean saka macem-macem parenteral (intravena, intramuskular, subkutaneus), bentuk dosis intranasal utawa implantasi ing kapsul khusus ing perawatan diabetes mellitus. Hubungan khusus yaiku nggawe formulir dosis sing diwenehake tanpa disuntik.

Kertas kasebut nglaporake nggawe sistem makromolekul kanggo administrasi oral, yaiku insulin sing ora immobilisasi ing volume hidrogen polimer sing diowahi karo inhibitor enzim proteolitik. Efektivitas obat kasebut yaiku 70-80% efektifitas insulin asli sing dikandung.

Ing karya liyane, tamba dijupuk dening inkubasi siji-langkah saka insulin karo sel getih abang, sing dijupuk ing rasio 1-4: 100, ing ngarsane agen sing naleni.Penulis nglaporake panrimo obat kanthi kegiatan 1000 unit / g, pengawetan lengkap kegiatan sawise administrasi oral lan panyimpenan sajrone pirang-pirang taun kanthi wangun lyofilisasi.

Saliyane nggawe obat lan bentuk dosis anyar adhedhasar insulin, pendekatan anyar dikembangake kanggo ngatasi masalah diabetes.

Mangkono, panulis ngilangi protein transporter glukosa GLUT2 cDNA sadurunge nate ditransfer nganggo cDNA insulin kanthi ukuran sel HEP G2.

Ing clone HEP G2 Insgl sing diperoleh, glukosa ngrangsang cedhak karo sekresi insulin normal lan potensial reaksi tanggapan kanggo stimulasi sekresi liyane.

Ing mikroskopi immunoelectron, granule sing ngemot insulin ditemokake ing sel sing padha karo morfologis kanthi granul ing sel-sel ing pulau-pulau Langerhans. Kemungkinan nggunakake "sel-tiruan" sing diciptakake dening teknik genetik kanggo perawatan diabetes jinis 1 mellitus saiki wis dirembug.

Bebarengan karo ngrampungake masalah praktis, mekanisme tumindak insulin, uga hubungan struktural lan fungsional ing molekul, diteliti. Salah sawijining metode panaliten yaiku nggawe macem-macem turunan insulin lan nyinaoni sifat fisikaokimia lan imunologis 23, 24.

Kaya sing kasebut ing ndhuwur, pirang-pirang cara kanggo produksi insulin adhedhasar nggayuh hormon iki ing bentuk prekursor (proinsulin), diikuti karo cleavage enzim kanggo insulin lan C-peptide. Saiki, anané kegiatan biologis wis ditampilake kanggo C-peptide, sing ngidini digunakake kanggo tujuan terapi bebarengan karo insulin.

Artikel ing ngisor iki saka seri iki bakal nimbang sipat fisik lan biologis C-peptide, uga cara kanggo nyiapake.

Bioteknologi ing Pabrik Narkoba

Sing penting yaiku pembangunan kanggo entuk versi STKh 20K. Tugas sing dijanjekake yaiku njupuk lan sinau ora mung macem-macem bentuk STH, nanging uga STH sing ora immobilisasi kanggo entuk tumindak hormon sing berpanjangan. Cara asli wis dikembangake kanggo nggayuh STHch sing ora immobilisasi kanthi tumindak berpanjangan.

Seja karo produksi STH, teknologi terintegrasi asli kanggo produksi hormon adenohypophysis, kalebu kabeh spesies spesies, lan sawetara modifikasi saka GST, digawe. Sing paling penting yaiku implementasi program target kanggo nggawe STH tamba terapi (somatogen), sing dipikolehi dening teknik genetik.

Pengalaman klinis wis nuduhake manawa, kanthi ngoptimalake perawatan kanthi cekak, luwih becik manawa ana ing arsenal sawetara persiapan farmaseutikal sing padha sing dipikolehi dening macem-macem teknologi utawa cara (MF, Ausomatin, Somatogen).

Perawatan jangka panjang (suwene taun) kanthi salah sawijining persiapan STHh nyebabake nyuda sensitivitas ing awak.

Ing bagean, iki bisa uga dadi akibat saka pembentukan antibodi, nanging alasan utama kudu digoleki ing tingkat reseptor lan pangolahan hormon kasebut.

Nggarap GST, uga paneliten lengkap babagan hormon sing dirembes lan macem-macem macem-macem supaya bisa sinau sistem sing digawe kanthi alam lan luwih ngerti. Wujud macem-macem bentuk stH asli ing awak nuduhake kemungkinan lan bisa digunakake, umpamane, ing klinik.

Nalika nggawe persiapan STHch anyar, luwih dhisik kudu fokus kanggo bentuk hormon alami asli lan, yen cocog, kanggo menehi skala kanthi teknik genetik, kaya sing ditindakake karo monomer STHch.

Ing produksi persiapan STHch saka GST, teknologi industri lengkap kanggo produksi hormon liyane adenohypophysis (LGH, FSHch, TTGch lan liya-liyane) wis ditindakake kanthi sukses. Sampeyan perlu ngoptimalake produksi kanthi ngenalake metode canggih anyar (kambungan kromatografi, dll.

), nampa hormon sing murni murni nggunakake teknologi terintegrasi.

Sampeyan perlu nggedhekake produksi lan nggunakake set immunomicroanalysis hormon hormon adenohypophysis kanggo diagnosis lan bioteknologi, kanggo nindakake produksi antibodi standar macem-macem skala, nggawe persiapan STHch anyar, kalebu sing ora immobilisasi.

Kasunyatane STH mengaruhi metabolisme protein, lemak, lan mineral, tumindak ing tingkat sel tanpa organ target, lan minangka anabolik, menehi prospek banget kanggo panggunaan kanggo ngrangsang proses ndandani lan nambani macem-macem penyakit. Panaliten sing luwih lengkap babagan masalah kasebut, uga kemungkinan nggunakake macem-macem bentuk lan variasi STGch, minangka tugas sing penting lan janji.

Nggayuh insulin ing bioteknologi

Insulin, hormon peptida ing pulo Langerhans saka pankreas, minangka perawatan utama kanggo diabetes. Penyakit iki disebabake kekurangan insulin lan dituduhake kanthi kenaikan glukosa getih. Nganti bubar, insulin dijupuk saka pankreas banteng lan babi.

Obat kasebut beda karo insulin manungsa kanthi substitutions asam amino, saéngga ana ancaman reaksi alergi, utamane ing bocah-bocah. Panggunaan terapi sing nyebar saka insulin dibatesi kanthi biaya akeh lan sumber daya winates.

Kanthi modifikasi kimia, insulin saka kewan digawe ora bisa dibedakake saka manungsa, nanging iki tegese kenaikan rega produk.

Wiwit taun 1982, EliLilly wis ngasilake insinyur insinyur genetik adhedhasar sintesis kapisah E. coli A lan B sing kapisah. Biaya prodhuk wis mudhun kanthi signifikan, sing ngasilake insulin padha karo manungsa. Wiwit taun 1980, ana laporan ing pers babagan kloning gen proinsulin, prekursor hormon sing ngowahi bentuk diwasa kanthi proteolisis terbatas.

Teknologi encapsulasi uga ditrapake kanggo perawatan diabetes: sel pankreas ing kapsul, sing dikenalake sepisan menyang awak pasien, ngasilake insulin sajrone taun.

Genetika Integrasi wis ngluncurake hormon stimulasi folikel lan luteinizing. Peptida iki dumadi saka rong subunit. Ing agenda kasebut yaiku sintesis industri hormon oligopeptida sistem saraf - enkephalins, sing dibangun saka 5 residu asam amino, lan endorphin, analog morfin.

Yen digunakake kanthi rasional, peptida iki ngilangake rasa nyeri, nggawe swasana ati sing apik, nambah kapasitas kerja, fokus perhatian, nambah memori, lan supaya turu lan tangi.

Conto aplikasi sukses teknik genetik yaiku sintesis p-endorphin nggunakake teknologi protein hibrid sing dijlentrehake ing ndhuwur kanggo hormon peptida liyane, somatostatin.

Cara kanggo ngasilake insulin manungsa:

Miturut sejarah, cara pertama kanggo njupuk insulin kanggo tujuan terapi yaiku ngisolasi analog saka hormon iki saka sumber alami (pulo saka pankreas sapi lan babi).

Ing taun 20-an pungkasan, ditemokake manawa insulin bovine lan daging babi (sing paling cedhak karo insulin manungsa ing struktur lan urutan asam amino) pameran ing awak manungsa sing padha karo insulin manungsa. Sawise iki, insulin sapi utawa babi digunakake kanggo dangu kanggo nambani pasien diabetes jinis I.

Nanging, nalika sawetara wektu dituduhake manawa ing sawetara kasus, antibodi menyang insulin bovine lan porcine wiwit nglumpukake ing awak manungsa, mula bakal negesake efek kasebut.

Ing sisih liya, salah sawijining kaluwihan saka cara njupuk insulin yaiku anané bahan mentah (bovine lan insulin daging babi bisa gampang dipikolehi kanthi jumlah akeh), sing nduwe peran sing penting ing pangembangan metode pertama kanggo ngasilake insulin manungsa.Cara iki diarani semi-sintetik.

Ing metode ngasilake insulin manungsa, insulin babi digunakake minangka panganan. Octapeptide C-terminal saka rantai B dibersih saka insulin porcine sing diresiki, sawise iku oplapeptida insulin C-terminal disintesis.

Banjur dilalekake sacara kimia, klompok protèktif dicopot lan asilé insulin diresiki. Nalika nyoba metode iki kanggo njupuk insulin, ditampilake identitas lengkap hormon sing dipikolehi kanggo insulin manungsa.

Kerugian utama cara iki yaiku biaya dhuwur saka insulin sing diasilake (sanajan saiki, sintesis kimia octapeptide minangka kesenengan sing larang, utamane ing skala industri).

Saiki, insulin manungsa biasane entuk rong cara: kanthi modifikasi insulin porcine kanthi cara sintetik-enzim lan metode teknik genetik.

Ing prakara pisanan, metode kasebut adhedhasar kasunyatan manawa insulin babi beda karo insulin manungsa ing siji substitusi ing C-terminus chain Ala30Thr B.

Penggantian alanine karo threonine ditindakake kanthi ngilangi alanine enzim-catalyne lan tambahan residu threonine sing dilindhungi klompok carboxy tinimbang kasebut, sing saiki ana kakehan ing campuran reaksi. Sawise ngresiki klompok O-tert-butyl protèktif, insulin manungsa dijupuk.

Insulin minangka protein pertama sing dipikolehi kanggo tujuan komersial nggunakake teknologi DNA rekombinan. Ana rong pendekatan utama kanggo ngasilake insinyur insinyur insinyur insulin gen.

Ing kasus sing kapisan, kapisah (galur produsen sing beda) dipikolehi kanggo loro rantai sing ditututi karo lempitan molekul (pembentukan jembatan disulfida) lan misahake isoform.

Ingkang kapindho, produksi ing bentuk prekursor (proinsulin) sing disusuli dening pencernaan enzim kanthi trypsin lan carboxypeptidase B dadi bentuk aktif hormon.

Saiki, luwih becik diwenehi insulin ing bentuk prekursor, sing njamin penutupan jembatan disulfida sing bener (yen ana persiapan rantai, siklus denaturasi sing sukses, pemisahan isoform lan renaturasi ditindakake).

Kanthi pendekatan loro, bisa uga entuk komponen wiwitan (A-lan B-chain utawa proinsulin), lan minangka protein protein hibrida. Saliyane rantai A lan B utawa proinsulin, protein hibrida bisa uga ngemot:

1) protein operator - nyedhiyakake transportasi protein hibrid menyang ruang periplasmik medium sèl utawa budaya,

2) komponen pangambungan - kanthi gampang ngasingake isolasi protein hibrida.

Ing kasus iki, komponen kasebut bisa bebarengan bebarengan ing komposisi protein hibrida. Kajaba iku, nalika nggawe protein hibrid, prinsip multidimensionality bisa digunakake (yaiku, sawetara salinan polipeptida target wis ana ing protein hibrida), sing bisa nambah paningkatan prodhuk target.

Ekspresi proinsulin ing sel E. coli ..

Strain JM 109 N1864 kanthi urutan nukleotida nyatakake protein fusi, sing kalebu proinsulin linear lan fragmen protein A Staphylococcus aureus sing dipasang ing N-terminus liwat residu methionine, digunakake.

Pengembangan biomas saturated sel galangan rekombinan nyedhiyakake wiwitan produksi protein hibrida, pengasingan lan transformasi urutan sing ana ing tabung nyebabake insulin.

Klompok peneliti liyane entuk protein rekombinan ing sistem ekspresi bakteri saka gabungan sing dumadi saka proinsulin manungsa lan buntut polyhistidine sing dilampirake liwat residu methionine. Iki diisolasi kanthi nggunakake kritis kratografi ing kolom Ni-agarose saka awak inklusi lan dicerna karo bryanida sianogen.

Pemetaan lan analisa spektrometrik massa sing diresiki dening proinsulin sing diresiki dening kromatografi pertukaran ion ing resin ijol-ijolan anion lan RP (fase terbalik) HPLC (kromatografi cair kinerja dhuwur) nuduhake anané jembatan disulfida sing cocog karo jembatan disulfida saka proinsulin manungsa asli. Iki uga dilaporake babagan metode pangembangan anyar, apik kanggo ngasilake insulin manungsa kanthi teknik genetik ing sel prokaryotik. Penulis nemokake yen asil insulin ing struktur lan kegiatan biologis padha karo hormon sing diisolasi saka pankreas.

Bubar, manungsa waé kanthi rinci wis diwiwiti kanggo nggawe prosedur kanggo ngasilake insulin rekombinan kanthi teknik genetik. Dadi, protein fusion dipikolehi sing dumadi saka peptide pimpinan interleukin sing dipasang ing N-terminus proinsulin liwat residu lysine. Protein kasebut sacara cekap diandharake lan dilokalisasi ing awake dhewe.

Sawise diisolasi, protein kasebut dicerna nganggo trypsin kanggo ngasilake insulin lan C-peptide. Klompok peneliti liyane tumindak kanthi cara sing padha. Protein gabungan sing kalebu proinsulin lan rong domain sintetis staphylococcus: A protein sing naleni IgG dilokalisasi ing badan sing kalebu, nanging nduwe tingkat ekspresi sing luwih dhuwur.

Protein kasebut diisolasi dening kromatografi IgG afinitas lan dicerna nganggo trypsin lan carboxypeptidase B. Asil insulin lan C-peptida diresiki dening RP HPLC. Nalika nggawe struktur sekring, rasio massa protein operator lan polypeptide target penting banget.

Konstruksi konstruk fusion diterangake ing ngendi protein serikat albumin serum manungsa digunakake minangka polypeptide operator. Siji, telu lan pitu C-peptides dipasang ing.

C-peptida disambungake kanthi dhasar sirah nganggo spacer asam amino sing nggawa situs larangan Sfi I lan rong residu arginine ing wiwitan lan ing pungkasan spacer kanggo pamisah protein sakteruse karo trypsin. HPLC produk cleavage nuduhake yen cleavage C-peptide minangka kuantitatif, lan iki ngidini panggunaan gen sintetik multimerik entuk polipeptida target ing skala industri.

Entuk proinsulin mutan, sing ngemot Arg32Tyr. Nalika protein iki dikepengini karo trypsin lan carboxypeptidase B, insulin asli lan C-peptida sing ngemot residu tirosine dibentuk. Sing terakhir, sawise menehi label 125I, aktif digunakake ing radioimmunoassay.

Insulin sing dimaksud kanggo ngasilake obat kudu resik. Mula, kontrol kesucian efektifitas produk sing dipikolehi ing saben tahap produksi perlu. Sadurunge, RP lan IO (tukar ion) HPLC digunakake kanggo menehi ciri proinsulin-S-sulfonate, proinsulin, A-lan B-chain, lan S-sulfonates.

Perhatian khusus uga dibayar kanggo turunan insulin neon. Ing karya kasebut, panulis nyinaoni babagan panggunaan lan informatif cara kromatografis ing analisis produk ing kabeh tahapan produksi insan lan nggawe jadwal operasi kromatografi kanggo sacara efektif misahake lan menehi ciri produk.

Kajaba iku, pendekatan dikembangake kanggo ngotomatisasi lan nyepetake proses kanggo nemtokake kesucian lan jumlah insulin.

Panaliten kemungkinan nggunakake kromatografi cair RP kanthi deteksi elektrokimia kanggo nemtokake insulin dilaporake, lan metodologi kanggo nemtokake insulin sing diisolasi saka isine Langerhans kanthi kriptografi immunoaffinity kanthi deteksi spektronik wis dikembangake.

Ing karya kasebut, kemungkinan nggunakake determinasi mikro kanthi cepet insulin nggunakake elektroforesis kapiler karo deteksi laser-fluoresensi.Analisa ditindakake kanthi nambah conto jumlah insulin sing dikepengini kanthi phenylisothiocyanate (FITC) lan potongan antibodi insulin monoklonal. Plugins lan label insulin biasa saingan karo kompleks Fab. Insulin sing label label FITZ lan kompleks karo Fab kapisah ing 30 detik.

Insulin insinyur genetik

Pitakonan apa sing digawe saka insulin iku ora mung kepentingan kanggo dokter lan apoteker, nanging uga kanggo pasien sing duwe diabetes mellitus, uga sedulure lan kanca-kancane.

Dina iki, hormon unik lan penting kanggo kesehatan manungsa bisa dipikolehi saka macem-macem bahan mentah kanthi nggunakake teknologi sing dikembangake khusus lan dites. Gumantung saka metode persiapan, jinis insulin ing ngisor iki dibedakake:

• Daging babi utawa bovine, uga disebut produk kewan
• Babi biosintetik sing wis diowahi
• Dirancang utawa direkayasa sacara genetik
• Dipunéwahi Genetik
• Sintetis

Insulin babi wis digunakake paling dawa kanggo diabetes. Aplikasi iki diwiwiti maneh ing taun 20-an pungkasan abad.

Sampeyan kudu nyathet yen daging babi utawa kewan dadi siji-sijine obat nganti 80an abad kepungkur. Kanggo entuk, jaringan pankreas kewan digunakake.

Nanging, cara iki ora bisa diarani optimal utawa prasaja: nggarap bahan mentah biologis ora mesthi trep, lan bahan mentah dhewe ora cukup.

Kajaba iku, komposisi insulin porcine ora ana sesambungan karo komposisi hormon sing diasilake dening wong sing sehat: macem-macem residu asam amino saiki ana ing struktur kasebut. Sampeyan kudu nyatet yen hormon sing diprodhuksi saka pankreas sapi duwe beda luwih, sing ora bisa diarani fenomena positif.

Ing persiapan kaya ngono, saliyane zat multisomponen murni, proinsulin sing diarani ora ana isi, bahan sing ora bisa dipisahake nggunakake metode pemurnian modern. Dheweke pancen asring dadi sumber reaksi alergi, sing mbebayani banget kanggo bocah lan wong tuwa.

Apotek maneh yen pengin golek dhuwit diabetes. Ana obat Eropa modern sing angel, nanging dheweke tetep ngilangi. Iki.

Kanggo alasan iki, para ilmuwan ing saindenging jagad wis suwe kepengin nggawe komposisi hormon sing diprodhuksi dening kewan kanthi tundhuk karo hormon pankreas saka wong sing sehat. Tumpakan nyata ing apotekologi lan perawatan diabetes yaiku produksi obat semi sintetik sing dipikolehi kanthi ngganti alanine asam amino ing obat kewan asale karo threonine.

Ing wektu sing padha, metode semi-sintetik kanggo ngasilake hormon adhedhasar panggunaan persiapan kewan. Kanthi tembung liyane, dheweke mung ngalami modifikasi lan dadi padha karo hormon sing diprodhuksi dening manungsa. Antarane kaluwihan yaiku kompatibilitas karo awak manungsa lan ora ana reaksi alergi.

Kerugian cara iki kalebu kekurangan bahan mentah lan angel nggarap bahan biologis, uga biaya tinggi teknologi kasebut uga obat sing diasilake.

Ing babagan iki, obat paling apik kanggo perawatan diabetes yaiku rekombinan insulin sing dijupuk dening rekayasa genetik.

Incidentally, asring diarani insinyur insinyur insulin, saéngga nuduhake metode sing bisa digayuh, lan prodhuk sing diasilake diarani insulin manungsa, mula bakal negesake identitas mutlak ing hormon sing diproduksi dening pankreas saka wong sing sehat.

Antarane kaluwihan insinyur insinyur gen, siji uga kudu menehi tandha babagan kemurnian lan kekurangan proinsulin, uga kasunyatan manawa ora nyebabake reaksi alergi lan ora ana contraindications.

Pitakonan sing asring ditrapake bisa dingerteni: apa persis sing digawe saka insulin? Pranyata hormon iki diproduksi dening galur ragi, uga colol Escherichia, diselehake ing medium nutrisi khusus. Kajaba iku, jumlah sing dipikolehi akeh banget amarga bisa nyingkirake obat-obatan sing dijupuk saka organ kewan.

Mesthi wae, iki ora mung babagan E. coli sing prasaja, nanging babagan modifikasi gen lan bisa ngasilake insinyur insinyur genetik manungsa sing larut, komposisi lan sifat sing padha karo hormon sing diproduksi dening sel pankreas saka wong sing sehat.

Kauntungane insinyur insinyur genetik ora mung padha karo mutlak hormon manungsa, nanging uga gampang kanggo nyiapake, jumlah bahan mentah lan biaya terjangkau.

Ilmuwan ing saindenging jagad nyebat produksi insulin rekombinan minangka terobosan nyata kanggo perawatan diabetes. Pentinge panemuan iki dadi saya gedhe lan penting yen angel dibuwang.

Cukup gampang kanggo dicathet yen saiki meh 95% kebutuhan hormon iki ditemoni kanthi bantuan insinyur insinyur.

Ing wektu sing padha, ewu wong sing sadurunge duwe alergi kanggo obat-obatan nampa kesempatan kanggo urip normal.

Aku ngalami diabetes kanggo 31 taun. Dheweke saiki wis sehat. Nanging, kapsul kasebut ora bisa dienggo wong biasa, dheweke ora pengin adol apotek, ora ana bathi kanggo wong-wong mau.

Kepiye cara insinyur insinyur insan

Ing perawatan saka diabetes mellitus jinis 1, nggunakake insinyur insinyur genetik rong tahap manungsa. Ing farmasi, didol kanthi bentuk solusi lan tandhani "Disayang". Penyakit jinis liya uga bisa diobati nganggo obat kasebut yen obat-obatan sing wis diwatesi ora cocog kanggo diabetes.

Insinyur insinyur genetik uga digunakake yen ana koma diabetes. Dokter asring nulis suntikan kanggo wanita ngandhut sing didiagnosis diabetes mellitus nalika pil-tingkat gula lan diet terapeutik ora nate mbantu.

Umumé, insulin sing direkayasa sacara genetis utawa GMO digunakake nalika nglairake bayi, nalika lagi ngalami operasi, utawa yen diabetes kena penyakit serius. Obat kasebut ngidini sampeyan kanthi aman ngalih menyang panggunaan hormon tumindak kanthi cepet.

1. Sadurunge nggunakake rékayasa genetik biphasic manungsa, kudu nyoba lan ngerti apa obat iki cocog kanggo pasien. Yen diabetes ngandhani hypoglycemia, panggunaan obat kasebut ora dianjurake.
2. Rencana tumindak solusi yaiku insinyur insinyur genetik sesambungan karo sel, sing ndadékaké pembentukan kompleks. Yen sel mlebu kompleks kasebut, dheweke dirangsang lan wiwit aktif kanthi aktif. Akibate, luwih akeh enzim sing diasilake.
3. Ing proses kasebut, glukosa diserep kanthi luwih cepet, karbohidrat sing mlebu awak bisa diolah kanthi aktif. Dadi, ati bisa ngasilake glukosa luwih suwe, lan protein bisa diserep luwih cepet.

Prinsip tumindak obat kasebut gumantung ing dosis, jinis insulin, situs injeksi. Cara apa wae kudu ditindakake mung sawise persetujuan karo dokter sing nekani. Injeksi pisanan ditindakake ing pengawasan medis.

Rekomendasi kanggo nggunakake tamba

Kaya utawa insinyur genetik biphasic manungsa duwe jeneng perdagangan sing beda. Uga, hormon bisa beda-beda sajrone tumindak, cara nyiapake solusi. Produk dijenengi adhedhasar jinis insulin.

Insulin sing direkayasa sacara genetik minangka bagean saka obat kayata Humudar, Vozulim, Actrapid. Insuran, Gensulin. Iki dudu dhaptar lengkap obat-obatan kasebut, cacahe cukup gedhe.

Kabeh obat ing ndhuwur beda-beda ing babagan cahya kanggo awak.GMO bisa tahan sawetara jam utawa aktif sajrone sedina.

Obat gabungan loro kalebu obat-obatan sing nyakup komponen tartamtu sing ngganti wektu panemune obat kasebut.

• Obat kasebut didol ing wangun campuran, kalebu hormon sing dijupuk gen.
• Dhuwit kasebut kalebu Mikstard, Insuman, Gansulin, Gensulin.
• Obat digunakake kaping pindho dina, setengah jam sadurunge mangan. Sistem kasebut kudu dipatuhi kanthi ketat, amarga hormon kasebut ana hubungane karo wektu asupan panganan.

Dening produksi gen manungsa, persiapan dipikolehi kanthi wektu cahya rata-rata.

1. Solusi kasebut ditrapake sajrone 60 menit, nanging wektu kegiatan sing paling dhuwur diamati enem nganti pitung jam sawise injeksi.
2. Obat kasebut rampung dibuang ing awak sawise 12 jam.
3. Obat kasebut kalebu Insuran, Insuman, Protafan, Rinsulin, Biosulin.

Ana uga GMO sing wektu cendhak cahya ing awak. Iki kalebu obat-obatan insulin Actrapid, Gansulin, Humulin, Insuran, Rinsulin, Bioinsulin. Insulin kaya kasebut duwe fase aktif sawise rong nganti telung jam, lan tandha-tandha pisanan obat kasebut bisa katon sajrone setengah jam sawise injeksi.

Sadurunge insulin diwenehake, GMO kudu ditliti transparansi lan anané bahan-bahan manca ing cairan kasebut. Yen bahan-bahan manca, kerusuhan utawa udan katon ing obat kasebut, wadhah kasebut kudu dibuwang - obat kasebut ora cocog kanggo digunakake.

Insulin sing digunakake kudu ana ing suhu kamar. Dosis hormon kasebut kudu disesuaikan yen diabetes kena infeksi, infeksi tiroid, penyakit Addison, hypopituitarism, lan penyakit ginjel kronis.

Serangan hipoglikemia bisa kedadeyan kanthi overdosis obat kasebut, sajrone kedadeyan transisi menyang jinis insulin anyar, amarga mangan pakan utawa overstrain fisik. Uga kesalahan kasebut bisa dadi penyakit sing nyuda kabutuhan hormon - tingkat ginjel sing abot, penyakit ati, kelenjar tiroid, korteks adrenal, lan kelenjar hipofisis.

1. Penurunan gula getih bisa ditindakake kanthi owah-owahan ing wilayah injeksi. Mula, perlu ngalih saka siji jinis insulin kanthi akal lan mung sawise persetujuan karo dokter sing nekani.
2. Yen pasien diabetes nggunakake insulin tumindak tumindak, kadhangkala volume jaringan lemak mudhun ing situs injeksi utawa, uga nambah. Kanggo nyegah iki, injeksi kudu ditindakake ing macem-macem papan.

Wanita hamil kudu ngerti yen syarat insulin bisa beda-beda sajrone trimester kehamilan. Kanggo nindakake iki, sampeyan kudu nganakake tes gula getih saben dina kanthi glukosa.

Tumindak insulin ing awak manungsa diterangake kanthi rinci ing video ing artikel iki.

1. Struktur lan fungsi insulin 5

1.1. Struktur molekul insulin 5

1.2. Intine biologis insulin 7

1.3. Inosis sintesis 8

2. sintesis insinyur insinyur genetik 10

2.1. Panganggone metode teknik genetik kanggo sintesis obat 10

2.2. Metode Teknik Genetik 11

2.3. Produksi insinyur insinyur genetik 14

Kesimpulan 18

Gejala overdosis

Nalika nggunakake insulin, penting kanggo ngetutake rekomendasi dhokter lan mirsani dosis sing tepat saka obat sing diwènèhaké.

Yen ora netepi aturan lan overdosis, pasien pasien wiwit lara sirah, cramp, keluwen, kringet, denyut jantung, wong kasebut dadi overworked, jengkel. Chills ing awak lan gemeter uga bisa diamati.

Gejala kasebut mirip banget karo tandha penurunan glukosa getih.Kanthi gejala entheng, pasien pasien bisa ngatasi masalah kasebut lan nambah kahanan kasebut. Kanggo nindakake iki, mangan permen utawa produk manis liyane sing ngemot gula.

• Yen koma diabetes dumadi, dheweke nggunakake solusi dextrose, obat kasebut ditrapake sacara intravena nganti wong ngerti. Ing pratandha sing curiga pisanan, kudu nelpon ambulans, sing bakal bisa urip pasien kanthi cara darurat.
• Minangka efek samping sawise nggunakake GMO, wong duwe ruam ing kulit kanthi bentuk urtikaria, bagean awak dadi gedhe, tekanan getih mudhun kanthi cetha, gatal lan sesak napas bisa kedadeyan. Iki minangka reaksi alergi kanggo obat, sing sawise sawetara dina bisa ilang tanpa campur tangan medis. Yen kahanan terus, sampeyan kudu takon karo dhokter.
• Ing dina-dina pisanan njupuk persiapan insulin, diabetes asring nyuda awak, wong ngalami kekurangan cairan, rasa kurang enak, bengkak ing lengen lan sikil katon, lan rasa ngantuk terus dirasakake. Gejala kasebut biasane lunga kanthi cepet lan ora surut.

Ulasan lan komentar

Aku duwe diabetes jinis 2 - ora gumantung karo insulin. Kanca kanca menehi saran ngedhunake gula getih karo DiabeNot. Aku dhawuh liwat Internet. Miwiti resepsi.

Aku ngetutake diet sing ora ketat, saben esuk aku wiwit mlaku-mlaku 2-3 kilometer kanthi mlaku. Sajrone rong minggu kepungkur, aku weruh nyuda gula ing meter esuk sadurunge sarapan saka 9.3 dadi 7.1, lan nganti 6 wingi.

1! Aku terus kursus pencegahan. Aku bakal nulis babagan sukses.

Margarita Pavlovna, aku uga lungguh ing Diabenot saiki. SD 2. Aku pancen ora duwe wektu kanggo mangan lan mlaku-mlaku, nanging aku ora nganiaya permen lan karbohidrat, aku mikirake XE, nanging amarga umur, gula isih dhuwur.

Asile ora kepenak sampeyan, nanging gula 7,0 ora metu seminggu. Glukosa apa sampeyan ngukur gula? Apa dheweke nuduhake sampeyan plasma utawa getih kabeh? Aku pengin mbandhingake asil saka obat kasebut.

Matur nuwun kanthi sanget kanggo kiriman informatif kaya iki.

Produksi insinyur insinyur genetik

Kanggo nggawe wong aran sehat, sampeyan kudu ngawasi tingkat insulin ing awak. Hormon iki kudu cukup supaya glukosa ora nglumpukake getih. Yen ora, ing kasus gangguan metabolik, dhokter diagnosis diabetes.

Terapi kanggo tahap lanjut saka diabetes mellitus yaiku nambahi konsentrasi insulin sing ilang, sing ora bisa diprodhuksi kanthi alami ing awak. Kanggo iki, insulin larut digunakake, sing padha karo insinyur gen. Pankreas tanggung jawab kanggo produksi hormon sing kaya ngono.

Kanggo produksi insulin, ora mung teknologi kanggo ngasilake hormon alami, produsen uga nggunakake insulin sing diowahi artifisial. Obat kasebut ditandhani "larut" dituduhake minangka larut.

Jinis obat

Kaya utawa insinyur genetik biphasic manungsa duwe jeneng perdagangan sing beda. Uga, hormon bisa beda-beda sajrone tumindak, cara nyiapake solusi. Produk dijenengi adhedhasar jinis insulin.

Insulin sing direkayasa sacara genetik minangka bagean saka obat kayata Humudar, Vozulim, Actrapid. Insuran, Gensulin. Iki dudu dhaptar lengkap obat-obatan kasebut, cacahe cukup gedhe.

Kabeh obat ing ndhuwur beda-beda ing babagan cahya kanggo awak. GMO bisa tahan sawetara jam utawa aktif sajrone sedina.

Obat gabungan loro kalebu obat-obatan sing nyakup komponen tartamtu sing ngganti wektu panemune obat kasebut.

• Obat kasebut didol ing wangun campuran, kalebu hormon sing dijupuk gen.
• Dhuwit kasebut kalebu Mikstard, Insuman, Gansulin, Gensulin.
• Obat digunakake kaping pindho dina, setengah jam sadurunge mangan. Sistem kasebut kudu dipatuhi kanthi ketat, amarga hormon kasebut ana hubungane karo wektu asupan panganan.

Dening produksi gen manungsa, persiapan dipikolehi kanthi wektu cahya rata-rata.

1. Solusi kasebut ditrapake sajrone 60 menit, nanging wektu kegiatan sing paling dhuwur diamati enem nganti pitung jam sawise injeksi.
2. Obat kasebut rampung dibuang ing awak sawise 12 jam.
3. Obat kasebut kalebu Insuran, Insuman, Protafan, Rinsulin, Biosulin.

Ana uga GMO sing wektu cendhak cahya ing awak. Iki kalebu obat-obatan insulin Actrapid, Gansulin, Humulin, Insuran, Rinsulin, Bioinsulin. Insulin kaya kasebut duwe fase aktif sawise rong nganti telung jam, lan tandha-tandha pisanan obat kasebut bisa katon sajrone setengah jam sawise injeksi.

Obat kasebut rampung dibuang saka awak sawise nem jam.

Gunakake insinyur insinyur insinyur insulin kanggo diabetes

Insinyur insinyur genetik manungsa minangka panggantos hormon umum kanggo insulin sing ngasilake pankreas.

Ora mung hormon manungsa sing wis genetik digunakake kanggo sintesis, nanging uga bahan sing digawe sintetik. Pilihan liyane terkenal kanggo nggawe obat kasebut yaiku nggunakake insulin babi sing diowahi, amarga

ing komposisi lan fungsine, paling cedhak karo manungsa.

Jadwal produksi insinyur insinyur genetik.

Indikasi lan kontraindikasi

Insinyur insinyur genetik bisa digunakake kanggo diabetes mellitus jinis 1 lan diabetes jinis 2, yen reaksi sing tetep kanggo obat oral kanthi sifat hypoglycemic diamati.

Iki bisa digunakake nalika pasien ana ing jinis koma tartamtu. Yen wanita meteng wis nate ngalami diabetes, mula nggunakake insulin teknik diidinake, nanging mung yen diet ora ngrewangi tingkat glukosa. Panggunaan kasebut dianjurake ing kasus infeksi infeksi sing bisa diandharake hyperthermia.

Persiapan Gene sukses ing panggunaan nalika nglairake anak, operasi, ciloko, gangguan metabolik lan sajrone transisi bertahap menyang insulin kanthi tumindak sing dawa.

Dilarang nggunakake persiapan gen ngganti hormon kanthi hipersensitifitas kanggo unsur obat tartamtu lan hipoglikemia.

Tumindak farmakologis

Obat saka jinis iki bereaksi karo reseptor tembok sel tartamtu, dadi kompleks. Nalika mlebu ing sel, kompleks obat kasebut mengaruhi karya kasebut, ngrangsang supaya luwih aktif lan ngasilake enzim tambahan.

Tingkat glukosa amarga kasunyatan diproses kanthi cepet dening sel. Sawise iku, proses lipogenesis, produksi protein digawe cepet lan kacepetan ati ing pambentukan glukosa.

Durasi obat kasebut bakal gumantung ing situs injeksi, jinis obat, dosis lan tanggapan individu awak manungsa. Mung dhokter sing bisa nyetel dosis lan resep obat tartamtu ing grup iki. Ing wektu wiwitan obat-obatan, pasien dipantau kanthi teliti dening dokter kanggo ngerteni apa obat kasebut ditolak.

Tuladha Ubat Insulin Manusia Insinyur Genetik

Insinyur insinyur genetik manungsa kalebu ing obat-obatan sing kondhang kayata Insuran, Insuman, Vozulim, Penfill, Biosulin, Gensulin, Actrapid, Rinsulin, Humulin, Humudar, Rosinsulin lan liya-liyane.

Ana macem-macem jinis insulin.Salah sawijining klasifikasi ana hubungane karo durasi obat kasebut. Miturut dheweke, insulin sing larut bisa tumindak cepet lan dawa. Ana obat-obatan sing digabungake (insulin biphasic), sing ngemot zat kanthi cepet lan tumindak sing dawa.

Pangobatan jinis iki diarani campuran. Antarane, ana sing digawe kanthi owah-owahan hormon manungsa. Insulin rong tahap yaiku Mikstard, Gansulin, Insuman, Humulin lan Gensulin. Dheweke kudu digunakake kaping pindho dina, setengah jam sadurunge mangan.

Iki amarga kasunyatane, loro-lorone insulin duwe zat sing padha tumindak cendhak, asupan kasebut gumantung saka panganan.

Analogisasi hormon manungsa kalebu ing antarane obat-obatan kanthi tingkat durasi rata-rata. Insulin sing larut iki wiwit tumindak sawise jam, lan puncak kegiatan kasebut dumadi sawise 7 jam. Sawise 12 jam, ditampilake. Obat insinyur genetik manungsa kanggo grup iki yaiku Insuman, Protafan, Humulin, Rinsulin, Biosulin, Gensulin, Gansulin, Insuran.

Ana obat sing direkayasa genetik manungsa ing antarane klompok kasebut kanthi tumindak sing cendhak. Contone, iki kalebu Gansulin, Insuran, Humulin, Rinsulin, Gensulin, Bioinsulin lan Actrapid. Insulin sing larut kasebut wiwit tumindak setengah jam, lan kagiyatane nganti maksimal ing sawetara jam. Obat kasebut diombe nganti 6 jam.

Ing kasus obat-obatan sing overdosis kanthi insinyur insinyur gen, ora ana rasa serem, keletihan, jengkel, nggegirisi, tambah ekskresi kringet, gemetung, palem, palpitations, sakit kepala, kekejangan lan keluwen bisa kedadeyan. Kabeh iki minangka gejala hipoglikemia.

Yen penyakit iki wiwit berkembang lan ana ing tahap sing luwih gampang, mula sampeyan bisa ngilangi kabeh gejala kasebut. Kanggo nindakake iki, sampeyan kudu mangan panganan kanthi gula lan karbohidrat, sing bisa dicerna kanthi gampang. Solusi glukagon lan dextrose bisa ditrapake ing awak.

Yen wong wis dadi koma, mula sampeyan kudu nyuntik solusi dextrose sing wis diowahi nganti kahanan saya mundhak.

Sawetara wong bisa nuwuhake reaksi alergi kanggo nggunakake obat sing diowahi gen kanthi insin. Gejala bisa uga kalebu sarang, bengkak, kekuwatan awak, tekanan darah rendah, sesak napas, ruam, demam, lan gatel.

Ing sawetara kasus, hypoglycemia lan koma dumadi. Masalah karo kesadaran manungsa lan uga koma bisa kedadeyan. Yen pasien ora kejawab obat, mula dheweke bisa ngalami hiperklikemia.

Katon amarga dosis rendah awal, kanthi kedadeyan fenomena infeksi ing awak, lan uga yen sampeyan ora netepi aturan babagan diet.

Ing sawetara kasus, pasien bisa ngalami lipodystrophy ing panggonan sing ditrapake obat kasebut.

Ing wiwitan panggunaan obat, puffiness, kurang banyu, rasa ngantuk, lan napsu napsu bisa kedadeyan. Nanging fénoména iki sak wentoro.

Panganggone sulih kanggo insulin alami, kayata bahan sing direkayasa sacara genetis, minangka tambahan kanggo perawatan diabetes.

Mbantu nyuda tingkat gula amarga kasunyatan sing glukosa luwih diserep dening sel, lan proses pangowahan transportasi. Nanging obat kasebut kudu digunakake kanthi ketat miturut resep dokter, amarga

dheweke bisa nyebabake efek kesehatan sing ora dikarepake kanggo pasien kasebut.

Apa sing digawe saka insulin?

Insulin minangka obat utama kanggo perawatan diabetes jinis 1. Kadhangkala uga digunakake kanggo stabilake pasien lan nambah kesejahteraan ing jinis kaloro. Zat kasebut kanthi alami yaiku hormon sing bisa mangaruhi metabolisme karbohidrat ing dosis cilik.

Biasane, pankreas ngasilake insulin sing cukup, sing mbantu njaga tingkat gula getih fisiologis. Nanging kanthi gangguan endokrin serius, siji-sijine kasempatan kanggo mbantu pasien asring disuntikake injeksi insulin.

Sayange, ora mungkin njupuk kanthi lisan (ing bentuk tablet), amarga wis rampung dirusak ing saluran pencernaan lan ilang nilai biologis.

Olahan sing dijupuk saka bahan mentah saka kewan

Entuk hormon iki saka pankreas babi lan sapi minangka teknologi lawas sing arang digunakake dina iki.

Iki amarga obat sing ditampa kanthi kualitas sing kurang, karep nyebabake reaksi alergi lan tingkat purifikasi.

Kasunyatane yaiku amarga hormon minangka bahan protein, kasusun saka asam amino tartamtu.

Insulin sing diproduksi ing awak babi beda karo komposisi asam amino saka insulin manungsa kanthi 1 asam amino, lan insulin bovine 3.

Ing wiwitan lan ing tengah abad kaping 20, nalika obatan sing padha ora ana, malah insulin kaya iki minangka terobosan obat lan ngidini njupuk perawatan diabetes ing tingkat anyar. Hormon sing dipikolehi nganggo cara iki nyuda gula getih, nanging asring nyebabake efek samping lan alergi.

Bedane komposisi asam amino lan impurities ing obat iki nyebabake pengaruh pasien, utamane ing pasien kategori sing luwih rawan (bocah lan wong tuwa).

Alasan liyane saka toleransi insulin sing ora apik yaiku anané prekursor ora aktif ing obat (proinsulin), sing ora mungkin bisa nyingkirake variasi obat iki.

Saiki, ana insulin daging babi maju sing ora ana kekurangan kasebut. Dheweke dijupuk saka pankreas babi, nanging sawise iku kena pangolahan lan purifikasi tambahan. Padha multicomponen lan ngemot excipients.

Insulin daging babi sing wis diowahi biasane ora beda karo hormon manungsa, mula tetep digunakake ing praktik

Obat kasebut bisa ditoleransi dening pasien kanthi cara sing luwih apik lan prakteke ora nyebabake reaksi ala, dheweke ora nyandhet sistem kekebalan lan nyuda gula getih. Insulin bovine ora digunakake ing obat saiki, amarga saka struktur manca sing menehi pengaruh negatif kanggo kekebalan lan sistem awak manungsa liyane.

Insulin Teknik Genetik

Insulin manungsa, sing digunakake kanggo diabetes, ing skala industri dijupuk kanthi rong cara:

Kahanan panyimpenan kanggo insulin

• nggunakake perawatan enzim sensitif insulin porcine,
• nggunakake galur modifikasi Escherichia coli utawa ragi.

Kanthi owah-kimia fisiko-kimia, molekul insulin porcine ing tumindak enzim khusus dadi padha karo insulin manungsa. Komposisi asam amino saka persiapan asil ora beda karo komposisi hormon alami sing diasilake ing awak manungsa.

Sajrone proses manufaktur, obat kasebut ngalami dimurnikeun, mula ora nyebabake reaksi alergi utawa liyane sing ora dikarepake.

Nanging sing paling asring, insulin dijupuk nggunakake mikroorganisme sing diowahi (gen. Nganggo cara bioteknologi, bakteri utawa ragi diowahi kanthi cara sing padha bisa ngasilake insulin.

Saliyane produksi insulin dhewe, pemurnian kasebut nduweni peran penting. Supaya obat kasebut ora nyebabake reaksi alergi lan inflamasi, ing saben tahap, perlu kanggo ngawasi kemurnian galur mikroorganisme lan kabeh solusi, uga bahan sing digunakake.

Ana 2 cara kanggo produksi insulin kasebut. Kaping pisanan adhedhasar panggunaan rong galur (spesies) saka mikroorganisme tunggal.

Kabeh padha gawe sintesis mung siji chain molekul DNA hormon (ana mung loro, lan dikonjol sacara spiritual).

Banjur ranté kasebut disambungake, lan ing asil sing diasilake wis bisa misahake bentuk insulin aktif saka sing ora nggawa makna biologis.

Cara kapindho kanggo obat kasebut nggunakake Escherichia coli utawa ragi adhedhasar kasunyatan yen mikroba pertama ngasilake insulin sing ora aktif (yaiku prekati, proinsulin). Banjur, nggunakake perawatan enzim, bentuk iki diuripake lan digunakake ing obat.

Wong sing duwe akses menyang fasilitas produksi tartamtu kudu nganggo klambi pelindung sing resik, nggawe kontak karo cairan awak manungsa sing ora

Kabeh proses kasebut biasane otomatis, udhara lan kabeh lumahing kontak karo ampul lan bokor sing resik, lan garis-garis nganggo peralatan disikat hermetically.

Cara bioteknologi ngaktifake para ilmuwan mikir babagan solusi alternatif kanggo diabetes.

Contone, saiki, pasinaon prelinical produksi sel beta pankreas, sing bisa dipikolehi kanthi nggunakake teknik rekayasa genetik.

Mbok manawa ing ngarep, dheweke bakal digunakake kanggo nambah fungsi organ iki ing wong sing lara.

Produksi persiapan insulin modern minangka proses teknologi sing komplek sing nglibatake automasi lan intervensi manungsa sing sithik

Komponen tambahan

Produksi insulin tanpa para pujian ing jagad modern meh ora bisa dibayangake, amarga bisa nambah sifat-sifat kimia, ngluwihi wektu tumindak lan entuk kemurnian sing dhuwur.

Kanthi properti, kabeh bahan tambahan bisa dipérang dadi kelas ing ngisor iki:

• pateri (bahan sing digunakake kanggo nyedhiyakake tamba sing luwih suwe),
• komponen disinfektan
• stabiliserer, amarga asam sing optimal diatasi ing solusi obat kasebut.

Ngencengi Aditif

Ana insulin sing dawa tumindak sing aktifitas biologis nganti 8 nganti 42 jam (gumantung karo klompok obat kasebut). Efek iki wis digayuh amarga tambahan zat khusus - permajanan kanggo solusi injeksi. Paling asring, salah sawijining senyawa ing ngisor iki digunakake kanggo tujuan iki:

Protein sing ndawakake tumindak obat kasebut ngalami pemurnian rinci lan kurang alergenik (e.g. protamin). Sink uyah uga ora mengaruhi kegiatan insulin utawa kesejahteraan manungsa.

Disinfektan ing komposisi insulin perlu supaya flora mikroba ora akeh sajrone panyimpenan lan nggunakake. Bahan kasebut minangka pengawet lan mesthekake pengawetan kegiatan biologis obat kasebut.

Kajaba iku, yen pasien menehi hormon saka siji vial mung awake dhewe, mula obat kasebut bisa bertahan nganti pirang-pirang dina.

Amarga komponen antibakteri kualitas tinggi, dheweke ora bakal kudu mbuwang obat sing ora digunakake amarga kemungkinan teori reproduksi ing solusi mikrob.

Bahan ing ngisor iki bisa digunakake minangka disinfectants ing produksi insulin:

Yen solusi kasebut ngemot ion seng, dheweke uga tumindak minangka pengawet tambahan amarga properti antimikroba

Kanggo produksi saben jinis insulin, komponen disinfektan tartamtu cocog. Interaksi karo hormon kasebut kudu diteliti ing tahap uji coba sadurunge, amarga pengawet ora kudu ngganggu kegiyatan biologis ing insulin utawa ora ana pengaruh sing negatif.

Panggunaan pengawet ing umume kasus hormon bisa diwenehake ing sangisore kulit tanpa perawatan sadurunge karo alkohol utawa antiseptik liyane (produsen biasane nuduhake prentah kasebut).

Iki nggampangake administrasi obat kasebut lan nyuda jumlah manipulasi preparat sadurunge injeksi kasebut dhewe.

Nanging rekomendasi iki mung bisa digunakake yen solusi kasebut ditrapake kanthi nggunakake jarum suntik insulin kanthi jarum tipis.

Stabiliser

Stabiliser perlu supaya pH larutan dijaga ing level sing diwenehake. Pengawetan tamba, kegiyatan lan stabilitas situs gumantung saka tingkat keasaman. Ing pabrik hormon injeksi kanggo pasien diabetes, fosfat biasane digunakake kanggo tujuan iki.

Kanggo insulin kanthi seng, para penstabil solusi ora dibutuhake, amarga ion logam mbantu njaga keseimbangan sing dibutuhake.

Yen digunakake, mula, senyawa kimia liyane ora dadi fosfat, amarga gabungan bahan kasebut nyebabake udan lan ora cocog obat.

Properti sing penting sing dituduhake kanggo kabeh penstabil yaiku safety lan kasedhiyan ora bisa mlebu reaksi apa wae karo insulin.

Endokrinologi sing kompeten kudu ngatasi pilihan obat kanggo diabetes kanggo saben pasien.

Tugas insulin ora mung kanggo njaga tingkat gula ing getih normal, nanging uga ora cilaka organ lan sistem liyane. Obat kasebut kudu netral, kurang alergenik lan luwih terjangkau.

Sampeyan uga cukup trep yen insulin sing dipilih bisa dicampur karo versi liya miturut durasi tumindak.

Entuk insulin kanthi teknik genetik, Bioteknologi - Kursus kerja

1. Struktur lan fungsi insulin 5

1.1. Struktur molekul insulin 5

1.2. Intine biologis insulin 7

1.3. Inosis sintesis 8

2. sintesis insinyur insinyur genetik 10

2.1. Panganggone metode teknik genetik kanggo sintesis obat 10

2.2. Metode Teknik Genetik 11

2.3. Produksi insinyur insinyur genetik 14